第三阶段 试管内受精及培养

取出的卵子根据其成熟度在培养器皿中培养数小时后与经过处理的精子相遇受精。取完后的第二天观察是否正常受精，并依据受精卵的状态再培养2~5天。

1. 冷冻保存受精卵

   

   • 可将部分受精卵冷冻保存（Cryopreservati on），试管婴儿手术失败时，可以在自然周期重新进行胚胎移植。

2. 未成熟卵子体外培养

   把利用腹腔镜或阴式B超提取的未成熟卵子培养成与自然排卵前的卵子一样成熟的状态。该技术可适用于取出的卵子中成熟卵子占少数而未成熟卵子占多数的患者，也可适用于因内分泌系统的缺陷所导致的卵子发育不良的患者。利用激素, 蛋白质及特殊培养液将取出的未成熟卵子进行体外培养。

3. 显微镜显微操作术

   

   • 因精子质量太差做试管婴儿也无法受精时采用该技术。利用显微操作仪用一支极细的针管，将单个精子直接注入卵子的细胞质内完成受精（ICSI）。该技术有了很大的发展，妊娠成功率也提高了很多与一般试管婴儿技术相差无几。

4. 卵子内直接注入圆形精子细胞的方法

   取出形成精子前一阶段的圆形精子细胞，用一支细管将单个圆形精子细胞直接注入卵子的细胞质内完成受精。该技术适用于因先天性及内分泌系统异常导致无精症的患者，可从这些男性患者的精巢取出圆形精子细胞实施该技术。目前其胚胎发生率及妊娠成功率比较低。

5. 囊胚期胚胎培养（特殊培养液和共同培养法)

   自然怀孕过程中被排出的卵子与精子相遇受精后，该受精卵在经细胞分裂发育至囊胚期（Blastocyst Stage）的第5日，经过输卵管进入子宫腔并在子宫内膜着床。可是已往做试管婴儿时是在取卵后第2日进行胚胎移植的，这是因为当时还没有建立取卵后能在体外培养到第5日的培养体系。我们玛利亚医院针对该问题在韩国国内首次研发配制了适用于各个胚胎发育阶段的培养液，同时又新研发出一种与卵子颗粒细胞共同培养的方法，使培养环境更利于胚胎的发育，并成功地将胚胎培养至着床前阶段的状态。